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      正確使用尺寸排阻色譜柱才能延長壽命

      發表時間:2021-12-23      點擊次數:433
         雖然對有機溶劑兼容的尺寸排阻色譜柱,受污染后都可以用清洗后再生,但并不是所有的污染物都能夠通過清洗去除的,正確使用離子色譜柱和采用合適的樣品預處理手段是延長離子色譜柱壽命的最好方法。
        一、陰離子交換色譜柱
        1.操作壓力
        離子交換色譜柱的操作壓力不能超過,色譜柱說明書中有規定的最大壓力,否則會造成色譜不可逆損失。
        2.色譜柱的啟動
        采用標準淋洗液(一般指等淋洗條件)使淋洗達到平衡后,進行色譜標準陰離子的測試分離度和重現性。
        3.尺寸排阻色譜柱的貯放
        一般情況下,可以采用標準淋洗液作為貯放液,長期貯放需要將色譜柱兩端密封。但對于非抑制型離子色譜柱或早期的抑制型離子色譜柱,由于所用淋洗液比較接近中性,用淋洗液貯放易于長霉,因此需要用高pH的溶液(如0.1 M NaOH)作貯放液,或者的淋洗液中加入防霉劑(如疊代氮)作貯備液。
        4.色譜柱的清洗
        對于陰離子色譜,通用有三種清洗方式,分別用于清洗酸溶性、堿溶性或有機污染物,在清洗過程中必須要確保嚴格按照清洗過程進行,否則會引起色譜柱的局部高壓而損壞色譜柱。對于有機溶劑清洗色譜柱,需要逐步減少有機溶劑的量以避免由于混和而造成的流動相粘度的變化。
        (1)選擇合適的清洗溶劑
        a.對低價親水污染物:用10倍的淋洗液;b.對高價親水污染物:用1到3M的鹽酸作淋洗液;c.對金屬污染物:會引起色譜峰不對稱性,如鐵離子會引起硫酸根和磷酸根的拖尾,鋁會引起磷酸根回收率降低,可采用絡合劑酸類,如0.2M 草酸;d.有機污染物:有機污染物會引起色譜柱效降低,可以采用兼容的有機溶劑清洗,有時也可以采用高濃度的鹽酸與有機溶劑混合清洗則更為有效,如200mM鹽酸和80%乙腈,但要注意這種溶液要混合立即使用,長時間混合會造成酸的分解并且損壞色譜柱。要特別注意色譜柱有機兼容性,如果該色譜柱只能對15%的有機溶劑兼容,這時有機溶劑濃度就不能超過15%。
        (2)清洗過程
        a.配制500mL合適的清洗溶液;
        b.斷開抑制器中,分別清洗保護柱和分離柱,如果分離柱和保護柱串聯清洗,則將保護柱接在分離柱之后;c.設置流速對2mm色譜柱采用0.5mL/min,而對4mm色譜柱采用1mL/min;d.用二次去離子水沖洗色譜柱15分鐘;e.用清洗液清洗色譜柱60分鐘;f. 用二次去離子水沖洗色譜柱15分鐘;g. 連接抑制器,用淋洗液平衡色譜柱。

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