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      關于離子排阻色譜柱應用的幾個相關問題

      發表時間:2022-04-22      點擊次數:173
         離子排阻色譜柱根據動態體積原理,用于眾多不同的生物大分子的色譜分離。以單分散多孔硅膠為基質,孔道結構經過特殊設計,并在硅膠表面涂覆中性親水層,將分析物與固定相之間的相互作用降到zui低。廣泛地應用于生物制藥、醫療和科研領域。
        離子排阻色譜柱多用不銹鋼制成,若果使用時柱壓不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填??罩鹘M件均為不銹鋼材質,能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。壓帽:即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板。
        1.使用一段時間后柱壓過高:
        解決方案:首先查看是否HPLC系統原因,排除系統原因后,原因基本是由于實驗過程中雜質在柱中的累積。盡量完善操作條件,做完樣品后要及時沖洗干凈,如緩沖鹽的流動相一定要用高比例的水溶液(如,90%)沖洗完全后再用有機相保存。
        2.篩板堵塞與柱頭塌陷:
        解決方法:如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,小心取下篩板,用5%左右的硝酸溶液超聲處理20分鐘左右,再用純水超聲20分鐘左右,重新裝入色譜柱。
        3.色譜柱頭的填料被樣品污染:
        解決方法:
        如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
        4.色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出:
        解決方法:
        如確定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。

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