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      SB色譜柱可以通過公式進行比較

      發表時間:2021-09-28      點擊次數:451
        SB色譜柱是高效色譜儀最主要的部件,被測物質能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用。因此,在日常工作中,應特別注意色譜柱的正確使用和維修保養,以延長色譜柱的使用壽命。
        SB色譜柱操作注意要點:
        (1) 裝柱
        柱子下面的活塞一定不要涂潤滑劑,會被淋洗劑帶到產品中的,可以采用四氟節門的。干法和濕法裝柱覺得沒什么區別,只要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應該要適度的緊密(太密了淋洗劑走的太慢),一定要均勻(不然樣品就會從一側斜著下來)。書中寫的都是不能見到氣泡,我覺得在大多數情況下有些小氣泡沒太大的影響,一加壓氣泡就全下來了。當然如果你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習了。但是柱子更忌諱的是開裂,甭管豎的還是橫的,都會影響分離效果,甚至作廢!
        (2) 加樣
        用少量的溶劑溶樣品加樣,加完后將下面的活塞打開,待溶劑層下降至石英砂面時,再加少量的低極性溶劑,然后,再打開活塞,如此,兩三次,一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗劑,一開始不要加壓,等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離(2~100px 就夠了),再加壓,這樣避免了溶劑(如,二氯甲烷等)夾帶樣品快速下行。
        (3) 淋洗劑的選擇
        感覺上要使所需點在 Rf0.2~0.3 左右的比較好。不要認為在板上爬高了分的比較開,過柱子就用那種極性,如果 Rf 在 0.6,即使相差 0.2 也不容易在柱子上分開,因為柱子是一個多次爬板的狀態。
        可以通過公式的比較:
        0.6/0.8一次的分離度,肯定不如(0.2/0.3)的三次方或四次方大。
        (4) 樣品的收集
        用硅膠作固定相過柱子的原理是一個吸附與解吸的平衡,所以,如果樣品與硅膠的吸附比較強的話,就不容易流出。這樣就會發生,后面的點先出,而前面的點后出。這時可以采用氧化鋁作固定相。
        另外,收集的試管大小要以樣品量而定,特別是小量樣品,如果用大試管,可能一根就收到了三個樣品。如果都用小試管那工作量又太大。
        (5) 最后的處理
        柱分后的產品,由于使用了大量的溶劑,其中的雜質也會累積到產品中,所以,如果想送分析,最好用少量的溶劑洗滌一下,因為,大部分雜質溶在溶劑里,一洗基本就沒了,必要時進行重結晶。

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